替硝唑葡萄糖注射液稳定性考察

疆医科大学第二附属医院药剂科   刘军　王长虹　林伊梅　王力　魏锦绣

摘要　HPLC法考察替硝唑葡萄糖注射液的稳定性。以甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶0.5)为流动相；色谱柱为C18；检测波长为317nm；柱温为35℃；用初匀速法计算有效期。结果：室温下替硝唑降解活化能为21.50kcal/mol，有效期为4.85年。

关键词：替硝唑；稳定性；初匀速法

　　替硝唑属于硝基咪唑类化合物，其抗厌氧菌和灭滴虫活性强于甲硝唑〔1〕。替硝唑葡萄糖注射液含替硝唑2g/L及50g/L葡萄糖，pH4～5〔2〕。为了考察替硝唑葡萄糖注射液的稳定性，本文用反相高效液相色谱法测定替硝唑含量，用初匀速法考察稳定性。

1　仪器与试药

1.1　仪器　SSI-2001型高效液相色谱仪；525型紫外检测器(美国科学系统仪器公司)；WZZ-2旋光仪(上海物理光学仪器厂)；pHS-3C型精密pH计(上海雷磁仪器厂)。

1.2　试药　替硝唑(印度，批号77371)；替硝唑葡萄糖注射液(自制)。

2　方法与结果

2.1　标准溶液的配制　准确称取干燥恒重的替硝唑0.1g于100ml量瓶中，加水溶解并加至刻度，得替硝唑标准溶液。准确称取干燥恒重的替硝唑约0.1g于干燥试管中，微火加热熔融稍变色，加甲醇溶解并定容于100ml量瓶中，即得替硝唑分解产物溶液。

2.2　色谱条件　十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相为甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶0.5)；检测波长317nm；柱温35℃；流速1ml/min。分别精密吸取替硝唑标准溶液和替硝唑分解产物溶液各适量，用水稀释成约60μg/ml，得色谱图见图1。

图1　替硝唑HPLC图
a-替硝唑　　b-替硝唑分解产物

2.3　标准曲线的制备　精密吸取替硝唑标准溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml于25ml量瓶中，加水至刻度，进样20μl，在上述色谱条件下进行测定。将替硝唑峰面积A对浓度C进行线性回归，得标准曲线方程为：C(μg/ml)＝3.423×10－5A＋0.138，r＝0.9997，替硝唑在20～120μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。方法平均回收率为100.9%±1.01%，RSD＝1.07%，日内误差RSD＝0.47%(n＝5)，日间误差RSD＝0.31%(n＝5)。

2.4　替硝唑葡萄糖注射液热稳定性　将替硝唑葡萄糖注射液分装于100ml输液瓶中，5组，压塞，封口，分别放置于60℃，70℃，80℃，90℃，98℃条件下，按设计时间取样，冰水浴冷却。精密吸取1.0ml，置25ml量瓶中，加水至刻度。进样20μl，按2.3项下方法测定，计算不同温度(T)的初匀速度V0，将lgV0对1/T回归得直线方程后，求反应的活化能及室温条件下的贮存期t20℃0.9，结果(见表1)。得回归方程为：

lgV0＝－4698×1/T＋10.396，(r＝－0.9869)。E＝21.5kcal/mol；t20℃0.9＝42488(h)＝4.85(y)。

表1　不同温度下替硝唑浓度测定结果(n＝3)

3　讨论

　　①文献报道替硝唑溶液的t20℃0.9＝6.11年〔4〕，替硝唑葡萄糖注射液的t20℃0.9＝16.24年〔2〕。本文经初匀速法预测替硝唑葡萄糖注射液在室温的t20℃0.9＝4.85年，与文献有较大差异。

　　②在测定替硝唑含量的同时，对各温度段注射液中葡萄糖含量及pH值进行了考察，结果葡萄糖含量及pH值变化不明显。

参考文献

〔1〕　李士敏，陈启琪，吴永江.替硝唑葡萄糖输液中替硝唑含量测定.现代应用药学，1996，13(4)：36
〔2〕　李士敏，陈建，方玲，等.替硝唑葡萄糖注射液的稳定性研究.中国医药工业杂志，1996，27(5)：216
〔3〕　庞贻慧，鲁纯素.药物稳定性预测方法.北京：人民卫生出版社，1984：80
〔4〕　涂家生，武志昂，赵安虎.替硝唑溶液稳定性的研究.中国药科大学学报，1996，27(9)：525